"HuP-T3 Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機會比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HuP-T3 Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我常看到一個比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
UPCI:SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PC3-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
HuP-T3 Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
NCIH1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
HT22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞
R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
Duke University 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-190PT細(xì)胞、EM3細(xì)胞、CMT64細(xì)胞
HUT-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
HuP-T3 Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
LC-2 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17.2細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
C-127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McARH7777細(xì)胞、TOV112細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
H9c2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU_145細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
MSTO-211 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞
SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞
SaOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.Hy926細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
LMH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：tdott細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞
TCMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞、H-23細(xì)胞
H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞
TERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-55細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞
PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
T 98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74Int細(xì)胞、MLA144細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
JROECL 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞
NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞
HIBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞
Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
CRFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-PAN2細(xì)胞、JVM3細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
MeT5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細(xì)胞、H2066細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞
Lewis Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI231細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞
CHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞
HuP-T3 Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
SNUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細(xì)胞、PY8119細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
ABC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1869細(xì)胞、L 363細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞
MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞
NCIH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT55細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞
OCILY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB3細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、CV-1細(xì)胞
RBMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞
Helacyton gartleri細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細(xì)胞、VP229細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/OHK細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、SW837細(xì)胞
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