"COV362 Adherent人卵巢癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
COV362 Adherent人卵巢癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
C 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
細胞生長特性：貼壁生長
COV362 Adherent人卵巢癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
MGH-U1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞
NCI-SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
HCE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞
CAL 12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
ECV-304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
COV362 Adherent人卵巢癌細胞系
HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
A-2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞
WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
EBC-1/original細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
BV2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
NCIH661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
SK-MEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
Tu-177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細胞、NIH:OVCAR-10細胞、WM2664細胞
HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
Chang Cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
WEHI 164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
NB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
HPF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
SK MEL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞
BT-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET1A細胞、Eph4 1424細胞、G-292 clone A141B1細胞
BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
SW 1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞
HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞
G-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞
KMS-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞
COV362 Adherent人卵巢癌細胞系
HNSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
HCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
VMM39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
P31/FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞
PC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞
Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、TE-85 clone 5細胞、BxPC-3細胞
PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細胞、TE15細胞、NCIH1792細胞
HT 1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL 6細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、BEL-7402細胞
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