"RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，３-４天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
細胞生長特性：貼壁生長
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：梭型和大的多核細胞
養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞特點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
MDA MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS-9L細胞、T-ALL1細胞、KMST-6細胞
CORL26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
H-1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
SU86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
CCD 966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞
NCI-H441-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞
SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
KPL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
Normal Rat Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞
Hs 746.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
SK Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
CA 46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
M-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
FDCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
ROS17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
WERI Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY細胞、SW1116細胞、U-343 MG細胞
Eph4 1424細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDMEC細胞、RBMVEC細胞、LC-2-Ad細胞
CL1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
Hs695細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞系
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
NR 8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
Hs-695-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細胞、HDLM-2細胞、T/G HA VSMC細胞
L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細胞、NIH:OVCAR-4細胞、SRS-82細胞
CORL26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細胞、Kit225/K6細胞、L5178-R細胞
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