"RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
SW 756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
T-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 39細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，３-４天換液１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
Hs 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細(xì)胞、A101D細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：梭型和大的多核細(xì)胞
養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，買個(gè)支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個(gè)人衛(wèi)生。
U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞
MDA MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS-9L細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞
CORL26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細(xì)胞、KMS11細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞
H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞、MCFs細(xì)胞
HLEC-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 16細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞
SGC-7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細(xì)胞、DHL5細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞
EBNA293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞、H-676細(xì)胞
CCD 966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS 751細(xì)胞、DHL8細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
HuCCT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
BHP 10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞
Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、Ca761細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
KPL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞
Normal Rat Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526 mel細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
SUM-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
M-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
Adeno-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞、8402細(xì)胞
H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
JIMT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
WERI Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY細(xì)胞、SW1116細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞
Eph4 1424細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDMEC細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞
CL1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞
Vero 76 clone E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC-Y細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞、CT-26細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
RD Adherent人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
NR 8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-30細(xì)胞、SF 539細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞
NCM356細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-299細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
CORL26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞
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