"OUMS-23 epithelioid cells人結腸癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
NCI-H-128細胞系相關產品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
NCI-H748細胞系相關產品:ARH 77細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、COR-L26細胞
H548細胞系相關產品:Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞
細胞生長:貼壁
OUMS-23 epithelioid cells人結腸癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
H-747細胞系相關產品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
NCI-H1836細胞系相關產品:GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
A375S2細胞系相關產品:H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
EU-3細胞系相關產品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關產品:VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
OUMS-23 epithelioid cells人結腸癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關產品:C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
ECV304細胞系相關產品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
143B TK-細胞系相關產品:GM03571細胞、MH-22a細胞、SK RC 52細胞
Co 205細胞系相關產品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
Panc05.04細胞系相關產品:HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
H146細胞系相關產品:NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞
RD細胞系相關產品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
MCA 38細胞系相關產品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關產品:VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
Vx-2細胞系相關產品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
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Clone 166細胞系相關產品:CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
KYSE-510細胞系相關產品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
GM00637I細胞系相關產品:NCIH292細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、HS-940-T細胞
KNS-62細胞系相關產品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
MT-2J細胞系相關產品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
B16-F0細胞系相關產品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
B16-F0細胞系相關產品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
NCIH2126細胞系相關產品:GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞
OCI-LY-19細胞系相關產品:CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
OCI-LY-1細胞系相關產品:Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
BT-549細胞系相關產品:H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞
HCC-1588細胞系相關產品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
HT 1080.T細胞系相關產品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
NCI-H2170細胞系相關產品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
B-3細胞系相關產品:COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
ASPC1細胞系相關產品:HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
SNU-638細胞系相關產品:Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞
MDA-MB 231細胞系相關產品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
CHO/dhFr-細胞系相關產品:MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
HONE-1細胞系相關產品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
SW 837細胞系相關產品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
NCIH929細胞系相關產品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
MIMVEC細胞系相關產品:A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞
WTRL1細胞系相關產品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
SU4細胞系相關產品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
KLN205細胞系相關產品:HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
HPC-Y5細胞系相關產品:GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
Panc 4.03細胞系相關產品:WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞
NKM1細胞系相關產品:ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關產品:alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
SNU-484細胞系相關產品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
Clone M-3細胞系相關產品:MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
GT39細胞系相關產品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關產品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
SU86.86細胞系相關產品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
NH6細胞系相關產品:MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產品:GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
NCIH1963細胞系相關產品:C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
J 774A.1細胞系相關產品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
H1299細胞系相關產品:C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
NHA細胞系相關產品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
MDA MB 231細胞系相關產品:L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
H-2141細胞系相關產品:67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞
6-10B細胞系相關產品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
H-209細胞系相關產品:253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
QGY細胞系相關產品:CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
D-341細胞系相關產品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
H2087細胞系相關產品:MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
NTERA2D1細胞系相關產品:MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
SiHa細胞系相關產品:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
OUMS-23 epithelioid cells人結腸癌細胞系
RBE4細胞系相關產品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
3T3F442A細胞系相關產品:Microbiological Associates-104細胞、RPE-1細胞、PAa細胞
N-Tera-2細胞系相關產品:RBL-2H3細胞、MOLP-2細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
143B TK-細胞系相關產品:GM03571細胞、SKO3細胞、SKM-1細胞
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