"SLMT-1 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
SUP T1細胞系相關產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
T 84細胞系相關產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞
NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品:G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
細胞生長:貼壁
SLMT-1 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
PE/CA-PJ-34細胞系相關產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
Kit 225細胞系相關產(chǎn)品:NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
NCIH1105細胞系相關產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
Leukemic 1210細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
HCC1954 BL細胞系相關產(chǎn)品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SLMT-1 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
T-47-D細胞系相關產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品:H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
MHCC 97細胞系相關產(chǎn)品:LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
CCD18細胞系相關產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
Panc5.04細胞系相關產(chǎn)品:Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
B16BL-6細胞系相關產(chǎn)品:MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
CAL-39細胞系相關產(chǎn)品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
DoTc2細胞系相關產(chǎn)品:Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
K562/ADR細胞系相關產(chǎn)品:LCMS細胞、PG-4細胞、HSC-I細胞
SLMT-1 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
TH1細胞系相關產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
CAL-62細胞系相關產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
NUGC4細胞系相關產(chǎn)品:HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞
32D.3細胞系相關產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
Hs 737.T細胞系相關產(chǎn)品:293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關產(chǎn)品:PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關產(chǎn)品:PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
UM-UC14細胞系相關產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
NCIH1975細胞系相關產(chǎn)品:SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產(chǎn)品:ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
C-26細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
Y3細胞系相關產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
HCC-1438細胞系相關產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
HEK AD293細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
COR-L51細胞系相關產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
Hs888T細胞系相關產(chǎn)品:C4 I細胞、LPC-H12細胞、GOS3細胞
RCC 786-O細胞系相關產(chǎn)品:IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
Hs-729-T細胞系相關產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
HCCC9810細胞系相關產(chǎn)品:Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
GM04671細胞系相關產(chǎn)品:HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
RPMI 7951細胞系相關產(chǎn)品:X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關產(chǎn)品:HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
EFM-19細胞系相關產(chǎn)品:SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
NCI H716細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
UACC 812細胞系相關產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
ECC1細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞
HepaRG細胞系相關產(chǎn)品:Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
H-650細胞系相關產(chǎn)品:LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
NGP細胞系相關產(chǎn)品:CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
Z310細胞系相關產(chǎn)品:NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
OVCAR-420細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
HOS(TE85)細胞系相關產(chǎn)品:HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞
SUM102細胞系相關產(chǎn)品:CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞
SK.MEL.5細胞系相關產(chǎn)品:Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
DU 4475細胞系相關產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
DU 4475細胞系相關產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
WM451細胞系相關產(chǎn)品:KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
UMUC-3細胞系相關產(chǎn)品:P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
LICCF細胞系相關產(chǎn)品:Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞
HSAS1細胞系相關產(chǎn)品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
WIL2 S細胞系相關產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
BaF3細胞系相關產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
RMS 13細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產(chǎn)品:HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
MCM細胞系相關產(chǎn)品:P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
CCC-HPF-1細胞系相關產(chǎn)品:rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
NCIH295R細胞系相關產(chǎn)品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
HL-7702細胞系相關產(chǎn)品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
SLMT-1 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
Functional Liver Cell-7細胞系相關產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
BALL-1細胞系相關產(chǎn)品:HepG2細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、SK-MEL5細胞
FL62891細胞系相關產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、Jurkat 77細胞、HSC2細胞
MHCC 97細胞系相關產(chǎn)品:LL2細胞、253JB-V細胞、EFM192C細胞
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