"NCI-H2227 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2227 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
實驗室細胞培養(yǎng)基知識簡介：干粉培養(yǎng)基：以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過濾，過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的，批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在大家都認同了；無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的，從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當(dāng)。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。
GA-10-Clone-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SNU449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
細胞生長特性：該細胞既有懸浮生長，又有貼壁生長
NCI-H2227 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
Clone 166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
MG-HU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
J-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293EBNA細胞、MDA-175細胞、NCI-H2172細胞
NCI-H2227 Adherent人小細胞肺癌細胞系
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
PIG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
HEK 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
CAOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
NCIH128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
L6565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
SU86_86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
Mv1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-361細胞、H1975細胞、P3X63細胞
IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
PAMC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
KBM7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞
TSU-Pr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
H766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27細胞、EAHY-926細胞、Y3Ag1.2.3細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞
NCI-H2227 Adherent人小細胞肺癌細胞系
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
NCI-H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞
HEK-293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細胞、HemECs細胞、KTA-7細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MC-3T3-E1細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細胞、A-253細胞、FAT細胞
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