"Pt K2 epithelioid cells袋鼠腎細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
H-2066細胞系相關產(chǎn)品:OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
HCC1438細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
N87細胞系相關產(chǎn)品:HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
細胞生長:貼壁
Pt K2 epithelioid cells袋鼠腎細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Rh30細胞系相關產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
NCIH727細胞系相關產(chǎn)品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
Z-138細胞系相關產(chǎn)品:H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品:SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
RKOE6細胞系相關產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Pt K2 epithelioid cells袋鼠腎細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
HCS-2/8細胞系相關產(chǎn)品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
Danio rerio Gill細胞系相關產(chǎn)品:SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞
Hs 870.T細胞系相關產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
JB6Cl30細胞系相關產(chǎn)品:MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
TE-4細胞系相關產(chǎn)品:GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
Caco2-BBE細胞系相關產(chǎn)品:Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產(chǎn)品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
KMST-6細胞系相關產(chǎn)品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
A-172MG細胞系相關產(chǎn)品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
Pt K2 epithelioid cells袋鼠腎細胞系
CHO cell clone K1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
JROECL 21細胞系相關產(chǎn)品:KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
D341 Med細胞系相關產(chǎn)品:A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
H-498細胞系相關產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
J 774A.1細胞系相關產(chǎn)品:Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
U-251細胞系相關產(chǎn)品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
P3HRI細胞系相關產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
OS-732細胞系相關產(chǎn)品:6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
SJ-Rh 30細胞系相關產(chǎn)品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞
WM-266-mel細胞系相關產(chǎn)品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
TCCSUP細胞系相關產(chǎn)品:DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
VE細胞系相關產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
OCI-AML-2細胞系相關產(chǎn)品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞
SW 527細胞系相關產(chǎn)品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
H35 Reuber細胞系相關產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
HT 1197.T細胞系相關產(chǎn)品:RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
REC 1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
CA 46細胞系相關產(chǎn)品:D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
GB1細胞系相關產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
U-138MG細胞系相關產(chǎn)品:NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
NCIH2023細胞系相關產(chǎn)品:CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
Pt K2細胞系相關產(chǎn)品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
SNU878細胞系相關產(chǎn)品:L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產(chǎn)品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
H-810細胞系相關產(chǎn)品:SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
PIGI細胞系相關產(chǎn)品:GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
SUDHL-10細胞系相關產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
T-98G細胞系相關產(chǎn)品:COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
hTERT RPE1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
HEK-AD 293細胞系相關產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
LC-2 ad細胞系相關產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
NCI-H716細胞系相關產(chǎn)品:GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞
SK-BR3細胞系相關產(chǎn)品:MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
SCL II細胞系相關產(chǎn)品:IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞
LM1細胞系相關產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
EU-2細胞系相關產(chǎn)品:TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
MCF 10A細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
ABC1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
BRL細胞系相關產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
MDA-MB-453細胞系相關產(chǎn)品:H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
TC7細胞系相關產(chǎn)品:KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
RERF-LCMS細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
L M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
KM12SM細胞系相關產(chǎn)品:OV90細胞、16-HBEo細胞、SW 948細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
NCI-H524細胞系相關產(chǎn)品:DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
ARH 77細胞系相關產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
OV-90細胞系相關產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
GB-1細胞系相關產(chǎn)品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
Pt K2 epithelioid cells袋鼠腎細胞系
16HBEo-細胞系相關產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
MAEC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH820細胞、SUM190細胞、KRC/Y細胞
K-1735細胞系相關產(chǎn)品:786.O細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、NCIH2023細胞
Hs 863.T細胞系相關產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、HCC1954BL細胞、RDES-1細胞
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