"EBTr epithelioid cells牛胚氣管細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
RIN m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、SF 295細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12A細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞、6-10B細(xì)胞
H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4-I細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、T8細(xì)胞
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
HBL-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
BV2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞
BV-173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞
TYKnu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1915細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞
DHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞、SBC5細(xì)胞
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細(xì)胞系
HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-295細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞
CCD19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞
CCD19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞
BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
LIXC002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML4細(xì)胞、Becker細(xì)胞、PC2細(xì)胞
UO.31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細(xì)胞、GB-1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87 MG細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMA細(xì)胞、H719細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
E304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細(xì)胞、3LL細(xì)胞、U138細(xì)胞
HM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1143細(xì)胞、P388D1細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
MFE-296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細(xì)胞、H-747細(xì)胞、A375mel細(xì)胞
U 266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-4細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞
D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞
T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞
UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞
MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞
Beta-TC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞
MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
J-774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞
Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細(xì)胞系
SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞
CV-1.K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVMANA細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞、RPE1細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、T-47D細(xì)胞
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