"EBTr epithelioid cells牛胚氣管細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
細胞生長:貼壁
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞
H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
A-431細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞
HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
BV2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
33604細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞
BV-173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
TYKnu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細胞系
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
WILL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
MV4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
LIXC002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞
HL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞
X63Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
OSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
Panc2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
H-220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
SU-DHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞
IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
SU86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
ROS1728細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞
BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
HELF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細胞、MBT-2細胞、CAL-120細胞
RCC 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
T98-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細胞、D341 Med細胞、OV1/P細胞
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
MCA-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN 1細胞、MOLT 3細胞、OCI Ly10細胞
H283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞
J-774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞
293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
EBTr epithelioid cells牛胚氣管細胞系
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos(RA1)細胞、Hs 281.T細胞、NCI H929細胞
CV-1.K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVMANA細胞、MOLP-8細胞、RPE1細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細胞、WM2664細胞、T-47D細胞
"
關(guān)鍵字: EBTr epithelioid cells牛胚氣管細胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實驗室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團隊,提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。