"CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
Hs 839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
SuDHL 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH 82細胞、Ly7細胞、H378細胞
細胞生長:貼壁
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
J82COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞
PA I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Colo741細胞、D10G41細胞
C22 (Clara)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
Hs 888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
U-373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細胞、WSU-DLCL-2細胞、PANC0327細胞
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞
HuH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
NCI-H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
NCI-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
UPCI:SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
MLA144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞
CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞
He-La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
TCCSUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
CNE-1 epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
Colo-206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo7e細胞、HA1800細胞、BE2C細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細胞、OCI-Ly07細胞、COLO 320F細胞
J82 COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細胞、SF539細胞、H-647細胞
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