"A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞
MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺(tái)上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時(shí)，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Neuro-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBSMC細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細(xì)胞、A2780細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
SVGp12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、TE354T細(xì)胞
TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細(xì)胞系
NCI-HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞、C33細(xì)胞
A 2780 CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-620細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞
LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞
NIH/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAPC2B細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞、MX-1細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
hMSC-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
AM-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK52E細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞、HN-6細(xì)胞
CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
SuDHL 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、CATHa細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞
C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞
TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞
OKa-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細(xì)胞、C33細(xì)胞、N-87細(xì)胞
CAL-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞
RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞
16-HBE14o細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12-PM6細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞
HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
RBL 2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2023細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞、C4-2細(xì)胞
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞
RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL6細(xì)胞、H-740細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
HDSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPsm細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
PK15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
LS 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1080細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞、H-661細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
HCC-2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞
MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞
TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細(xì)胞系
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-Mel細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、DHL6細(xì)胞
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