"CMT167 epithelioid cells小鼠肺癌細胞系
細胞背景資料:肺腺癌;雌性;C57BL/ICRF-a(t)
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
CT-26 WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
細胞生長:貼壁
CMT167 epithelioid cells小鼠肺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
SNU-368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞
MH-22a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
LTPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CMT167 epithelioid cells小鼠肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
SK-CO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞
PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
WEHI164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
CCLP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
Ls-174-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞
HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
CMT167 epithelioid cells小鼠肺癌細胞系
PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
Hep G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU1細胞、NCI-H187細胞、C8166-CD4細胞
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞
Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
SK-BR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
SUM102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
VSC4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
HCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
HS 683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
H-2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
ME 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞
CMT167 epithelioid cells小鼠肺癌細胞系
A2780/CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞
AAV-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P19細胞、H2108細胞、HET1A細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-5細胞、SKCol1細胞、K7M2細胞
SK-CO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細胞、H82sclc細胞、GB1細胞
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