"6-10B epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
細胞背景資料:鼻咽癌
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數活細胞數,用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
SF763細胞系相關產品:H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
BLO 11細胞系相關產品:COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
HCT-15細胞系相關產品:HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
細胞生長:貼壁
6-10B epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據細胞株數據單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內。依據細胞種類和濃度,于無菌操作臺內取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
aTC1-6細胞系相關產品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
THLE-2細胞系相關產品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
EL 4細胞系相關產品:L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞
H-508細胞系相關產品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
CCD-966SK細胞系相關產品:P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
6-10B epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
U-937細胞系相關產品:MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
High 5細胞系相關產品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
H-1404細胞系相關產品:RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
Panc02.03細胞系相關產品:H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關產品:GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
McARH7777細胞系相關產品:NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
DHL-16細胞系相關產品:MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
PA-TU-8988S細胞系相關產品:NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
NCI-SNU-1細胞系相關產品:HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
H1694細胞系相關產品:beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
6-10B epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
CTX TNA2細胞系相關產品:JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
RN-c細胞系相關產品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
Capan 1細胞系相關產品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
CHO-K1細胞系相關產品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
VM-CUB1細胞系相關產品:HSC4細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞、SW-948細胞
T-HSC細胞系相關產品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
T-HSC細胞系相關產品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關產品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
NCI-H774細胞系相關產品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
Panc_05_04細胞系相關產品:JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
MyLa2059細胞系相關產品:SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
U138MG細胞系相關產品:HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
T241細胞系相關產品:JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
Metastatic Variant-522細胞系相關產品:NCI-H2291細胞、GH 3細胞、Granta 519細胞
NBLAN5T細胞系相關產品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
THLE-2細胞系相關產品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
NIH:OVCAR-3細胞系相關產品:Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞
MOLM-16細胞系相關產品:McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
HOS/MNNG細胞系相關產品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
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NTERA-2 clone D1細胞系相關產品:NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
Hs746-T細胞系相關產品:DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
SupT1細胞系相關產品:HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
MV 4;11細胞系相關產品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
KFB細胞系相關產品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
SW-13細胞系相關產品:B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
MFE280細胞系相關產品:EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
MF2059細胞系相關產品:WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
Be-Wo細胞系相關產品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
H-2135細胞系相關產品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
WM 239A細胞系相關產品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
SU-DH-L5細胞系相關產品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
F-36P細胞系相關產品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
CAL 78細胞系相關產品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
B16F0細胞系相關產品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
IM-9細胞系相關產品:SW948細胞、CPA47細胞、NCL-H548細胞
H735細胞系相關產品:Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
RCC-JF細胞系相關產品:HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
UM-UC3細胞系相關產品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
SK-MEL-24細胞系相關產品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
Hs-578T細胞系相關產品:MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
GM00215細胞系相關產品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
RCC-JF細胞系相關產品:HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
A 549細胞系相關產品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
2BS細胞系相關產品:alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
KM-H2細胞系相關產品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
RERF-LCMS細胞系相關產品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞
alpha TC1-6細胞系相關產品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關產品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
JVM2細胞系相關產品:YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
IAR 20細胞系相關產品:NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
6-10B epithelioid cells人鼻咽癌細胞系
UO.31細胞系相關產品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產品:NCIH2009細胞、H-1650細胞、NCIH2126細胞
SKNBE2C細胞系相關產品:C17細胞、H660細胞、CAL851細胞
H1404細胞系相關產品:He-La細胞、INS-1E細胞、H889細胞
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