"PCI-04B epithelioid cells人喉鱗癌細胞系
細胞背景資料：喉鱗癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
細胞生長：貼壁
PCI-04B epithelioid cells人喉鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
J774A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PCI-04B epithelioid cells人喉鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
NTERA2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細胞、H378細胞、BT-549細胞
OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
KNS81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
NCL-H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
WC00097細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
PCI-04B epithelioid cells人喉鱗癌細胞系
T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
NOMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
NCI-H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
bEnd3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
L5178Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
MC3T3-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
U-226AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
PANC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞
VK-2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
SK-RC 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
R.K.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞
H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
Tu212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
NBL_S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞
SF17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
PCI-04B epithelioid cells人喉鱗癌細胞系
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
SW-1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細胞、MDCK supertube細胞、CMT 93細胞
PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC154細胞、NuTu 19細胞、RPE-1細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、LA-N-6細胞、COLO-HSR細胞
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