"KYSE-510 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞背景資料:食管鱗癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
M07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
MDA231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細胞、Panc813細胞、KU-812細胞
細胞生長:貼壁
KYSE-510 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
OVCA 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
C32 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA-DX5細胞、C1R細胞、NGEC細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KYSE-510 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞
SK-NEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
SW-480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞
KYSE-510 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
Hep 3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
H-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
SW-962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞
KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
TOV21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
H-2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
293GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
COLO824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
NCI-H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞
NCI H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
253J B-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
H-1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC366細胞、CG4細胞、COLO-680N細胞
RLE-6TN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
COLO680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
OVCAR 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞
KYSE-510 epithelioid cells人食管鱗癌細胞系
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
A-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co-115細胞、SUM190PT細胞、MDCK細胞
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-14細胞、LICCF細胞、HN13細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2228細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
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