"NCI-H2444 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解:1)收到細(xì)胞,首先要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí),則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下,會(huì)調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右,才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長期的狀態(tài),在對(duì)數(shù)生長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對(duì)于生長較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型,一次少傳些,每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞,次處理也可以依照第二種情況。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2444 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我??吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法,這個(gè)挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細(xì)胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞
T 98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細(xì)胞、MLA144細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
NCI-H2444 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。
DAKIKI Clone 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
RPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA-FLSs細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、H2286細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
SK-N-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
GM04154B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
HLE-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞
NCI-H2444 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
PANC0813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293c18細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
NCI N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞
Calu-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-378細(xì)胞、OP-9細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞
Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
NCIH810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2126細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞、LS513細(xì)胞
FHL-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL3細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞
NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞
Hs737T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN 205細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞、HA細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
MT-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞
U343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-Jurkat細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
PC3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞
NCI.H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-B細(xì)胞、5-8F細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT8細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞、SUM159細(xì)胞
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
MDA134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 1細(xì)胞、H-1993細(xì)胞、MDCK細(xì)胞
HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
M-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC9810細(xì)胞、CAL148細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
SNU251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 513細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞
HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞
QGP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞
C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMF細(xì)胞、YH-13細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞
NCI-H2444 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
HRA19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞
PL45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞
OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞
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