"NCI-H2444 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2444 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
HOC細胞系相關產(chǎn)品：H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
T 98 G細胞系相關產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
細胞傳代方法：１：３-１：４傳代；每周換液２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
SW403細胞系相關產(chǎn)品：V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
S37細胞系相關產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H2444 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
DAKIKI Clone 1細胞系相關產(chǎn)品：A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
SK HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
MHCC 97-H細胞系相關產(chǎn)品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
RPMC細胞系相關產(chǎn)品：RA-FLSs細胞、NeHepLxHT細胞、H2286細胞
Lu99A細胞系相關產(chǎn)品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
SK-N-SH細胞系相關產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
RCCJF細胞系相關產(chǎn)品：HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
RT4細胞系相關產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
RLE-6TN細胞系相關產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
GM04154B細胞系相關產(chǎn)品：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
HLE-B3細胞系相關產(chǎn)品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
NCIH1993細胞系相關產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
NCI-H2444 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
IGROV細胞系相關產(chǎn)品：HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
MDA361細胞系相關產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
COLO-357細胞系相關產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
PANC0813細胞系相關產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
NCI N87細胞系相關產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
Calu-3細胞系相關產(chǎn)品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
Caov-3細胞系相關產(chǎn)品：BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
LL/2細胞系相關產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
NCIH810細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
FHL-124細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
H-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
NCIH2073細胞系相關產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
COLO-680N細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
SW1222細胞系相關產(chǎn)品：HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞
NCI-H102細胞系相關產(chǎn)品：KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
Hs737T細胞系相關產(chǎn)品：KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
639-V細胞系相關產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
MT-2J細胞系相關產(chǎn)品：SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
NCI-H441細胞系相關產(chǎn)品：HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
OCI-LY-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
U343MG細胞系相關產(chǎn)品：JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
Mink細胞系相關產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
PC3M-1E8細胞系相關產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
NCI.H226細胞系相關產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
KATO III細胞系相關產(chǎn)品：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞
CaES-17細胞系相關產(chǎn)品：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞
HCC38細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
8505C細胞系相關產(chǎn)品：BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
SK-N-BE2細胞系相關產(chǎn)品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
WEHI-3B細胞系相關產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
MDA134細胞系相關產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
HPAF細胞系相關產(chǎn)品：Hs 729細胞、SKMEL-24細胞、SNK1細胞
M-20細胞系相關產(chǎn)品：HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞
BALB/3T3細胞系相關產(chǎn)品：GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞
SNU251細胞系相關產(chǎn)品：LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞
HBZY1細胞系相關產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
QGP 1細胞系相關產(chǎn)品：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
Hepa-RG細胞系相關產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
C-4I細胞系相關產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
NCI-H2444 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
HFL 1細胞系相關產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
PANC-1細胞系相關產(chǎn)品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
RPMI6666細胞系相關產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
HRA19細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
Kit 225-K6細胞系相關產(chǎn)品：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
PL45細胞系相關產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
PC615.3細胞系相關產(chǎn)品：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
LoVo細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關產(chǎn)品：STC-1細胞、TE-85細胞、CF PAC-1細胞
OVHM細胞系相關產(chǎn)品：MV-522細胞、NCIH2291細胞、GP2-293細胞
MHCC 97-H細胞系相關產(chǎn)品：NIT-1細胞、Tn-5B1-4細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
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