"NCI-H1563 Adherent人胚肺細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻,通常操作步驟:做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是我們最常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻:要么中間密周?chē)?,要么周?chē)苤虚g禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開(kāi)一點(diǎn)孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基,晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤(rùn)孔底,其它孔依此類(lèi)推,這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的,細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底,注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒(méi)有96孔板好掌握,效果沒(méi)有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后),先順時(shí)針搖晃3次,馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H1563 Adherent人胚肺細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專(zhuān)題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見(jiàn),可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來(lái),細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題,很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到,雖然通過(guò)其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細(xì)胞、H1781細(xì)胞、GM3569細(xì)胞
RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
NCI-H1563 Adherent人胚肺細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲(chóng)的污染情況總結(jié)】原蟲(chóng):培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng),只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗,以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水;2)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大,風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞
HS-294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞
JKT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細(xì)胞、C166細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞
MSTO-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞
NBL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞
alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞
Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞
Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞
H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞
NCI-H1563 Adherent人胚肺細(xì)胞系
Clone Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu65細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞
BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149PT細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
alpha TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細(xì)胞、H-1688細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞
UPCISCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC133細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞、138 MG細(xì)胞
CF-PAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2452細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
MGC-803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
MCA-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
FK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-10細(xì)胞、DMS53細(xì)胞、A375SM細(xì)胞
Kit225/K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J111細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞
NCIH660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞
MRAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細(xì)胞、LS-123細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
OVCA 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES2細(xì)胞、NT-2細(xì)胞、HOC細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
LICR-LON-HN6-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞
HSAS4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2058細(xì)胞、C8166細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
SW527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R3/1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞
NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
PANC0504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細(xì)胞、HIT細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞
NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
EoL-1 cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746-T細(xì)胞、NGP細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞
U-87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細(xì)胞、A375細(xì)胞、T98 G細(xì)胞
AD-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞
DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh 74細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞、HMEC細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
HOS(TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAVSMC細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞
NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
NCI-H1563 Adherent人胚肺細(xì)胞系
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞
SK-ChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞
TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:tdott細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞
HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞
NCIH3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy 926細(xì)胞、A-375細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細(xì)胞、NB4細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、PG13細(xì)胞
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