"NCI-H2110 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng),以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開(kāi)口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動(dòng)作要輕,以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H2110 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞
NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代,每周換液2-3次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞
SCC25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
NCI-H2110 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
C4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
JiyoyeP-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞
10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
NCI-H2110 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞
NCIH2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細(xì)胞、CD-18細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
JeKo-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞
SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞
NCI-H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 180細(xì)胞、H22細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
NK-92 MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
NCI-H2110 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
MDBK (NBL-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞
NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞
KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞
MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
HP615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L Wnt-3A細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
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