"NCI-H774 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H774 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
NCI-H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FC33細(xì)胞、GM04671細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：每周換液２次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞
BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
NCI-H774 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞
MDA1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞、MN-60細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
H-838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP-1細(xì)胞、ACC3細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞
DU145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞
NCI-H774 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞
RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞
MPVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
QGY7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
SK-NM-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVSMC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞
SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞
MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞
RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞
D-341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT2細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
Rat podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞
MFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-L1細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞
Cor L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1573細(xì)胞、SW-900細(xì)胞、CV1細(xì)胞
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞
SK-LU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞
SK-LU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞
MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
NK-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞
NCI-H774 Adherent人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
RMG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC7721細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞
H-1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細(xì)胞、L02細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
HuTu 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、N-87細(xì)胞
Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL6細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR.OV1細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
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