"NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周?chē)缓笸ㄟ^(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,見(jiàn)到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié),這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn),因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近300種細(xì)胞,常用于做實(shí)驗(yàn)的,累積有百余種,可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開(kāi)始做我的篇專(zhuān)題,并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話(huà)題,我就拋磚引玉,下面幾點(diǎn)拙見(jiàn),可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn),也見(jiàn)到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn),就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識(shí),如果不對(duì)之處,歡迎指正,總結(jié)下來(lái),細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話(huà))。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題,很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到,雖然通過(guò)其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?,總覺(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn),而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的問(wèn)題。
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:4傳代;2-3天換液1次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
IPLB-SF-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞、786O細(xì)胞
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿(mǎn)器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马?xiàng)】1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí),消化時(shí)間應(yīng)縮短,過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞
SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-L細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A/C1細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞、U-251細(xì)胞
H-3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
C-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞
NCIH2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH-4細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞
NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞
SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
MOLT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細(xì)胞系
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
HS 1.Tes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
P31-FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞、SL-29細(xì)胞
KYSE 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞
LNCaP.FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞
SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
B16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞
RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
3T3 L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞
OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞
A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞
Y3.AG.1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞
NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞
TOV21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細(xì)胞系
SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞
3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cells細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC145細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞
MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hs 68細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞
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