"NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經驗總結,這里說一些我個人的經驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結經驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要),關鍵所在是細胞來源,血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
Jurkat-FHCRC細胞系相關產品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
HEC1B細胞系相關產品:PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
GM02131A細胞系相關產品:B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞
細胞傳代方法:1:3-1:4傳代;2-3天換液1次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
EVSA/T細胞系相關產品:OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
IPLB-SF-21細胞系相關產品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
OCI-Ly3細胞系相關產品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液;2)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內加入Hanks液少量,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當消化液濃度過高時,消化時間應縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
NCIH1975細胞系相關產品:SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
SNU-216細胞系相關產品:MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
Hs840_T細胞系相關產品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
CA 46細胞系相關產品:D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞
Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關產品:DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞
H-3255細胞系相關產品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
C-26細胞系相關產品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
NCIH2286細胞系相關產品:IHH-4細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、HCT/Taxo1細胞
NT2-D1細胞系相關產品:Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
SNU-387細胞系相關產品:H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關產品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
H-1975細胞系相關產品:SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
MOLT 3細胞系相關產品:BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細胞系
Kit225-K6細胞系相關產品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
Onda 11細胞系相關產品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
HS 1.Tes細胞系相關產品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
HS 1.Tes細胞系相關產品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
FUOV1細胞系相關產品:COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞
rRMECs細胞系相關產品:NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
P31-FUJ細胞系相關產品:801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
KYSE 70細胞系相關產品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
LNCaP.FGC細胞系相關產品:NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
DoHH2細胞系相關產品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
Namalwa細胞系相關產品:A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
SNU449細胞系相關產品:BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
OVCAR.4細胞系相關產品:CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
COLO 824細胞系相關產品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
NPC-039細胞系相關產品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
SF 539細胞系相關產品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞
Hs739T細胞系相關產品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關產品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
B16細胞系相關產品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
RGB細胞系相關產品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
Hs-27細胞系相關產品:SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
HT 29細胞系相關產品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
3T3 L1細胞系相關產品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
OVCAR-8細胞系相關產品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
D-407細胞系相關產品:HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞
RH7777細胞系相關產品:KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
DoHH2細胞系相關產品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
H-1930細胞系相關產品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
MLE-12細胞系相關產品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
C2A細胞系相關產品:HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞
A375.S2細胞系相關產品:DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞
Y3.AG.1.2.3細胞系相關產品:Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
NHRF細胞系相關產品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
MDA468細胞系相關產品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
H-847細胞系相關產品:Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
SF 767細胞系相關產品:TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關產品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
Saos2細胞系相關產品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
TOV21細胞系相關產品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產品:Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
SHP77細胞系相關產品:HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞
NCIH2122細胞系相關產品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
NCI-H1373 Adherent人肺癌腺癌細胞系
SKRC 39細胞系相關產品:JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
3T6細胞系相關產品:L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
Plaepi 34細胞系相關產品:MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
Calu 3細胞系相關產品:MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
U-266 AR1細胞系相關產品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
HCC15細胞系相關產品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關產品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
SSP-25細胞系相關產品:NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關產品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
NTERA2D1細胞系相關產品:MARC145細胞、OVCA 432細胞、NCI-H1092細胞
MCF12F細胞系相關產品:hs 68細胞、NCIH1781細胞、IM-95細胞
Hs839T細胞系相關產品:U-87MG ATCC細胞、HG2855細胞、CAL 27細胞
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