"ACHN Adherent人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞1979年建系,源自一名22歲患有腎細(xì)胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細(xì)胞的生長(zhǎng),該細(xì)胞多用于干擾素及其誘導(dǎo)劑的抗增殖研究。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng),以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開(kāi)口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動(dòng)作要輕,以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
ACHN Adherent人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
UCLA-SO-M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞
AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞
NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代,每周2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞
Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
ACHN Adherent人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題,究竟是什么原因?qū)е?,我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決?以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過(guò)程中的問(wèn)題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng);3)對(duì)冷凍液過(guò)敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng),存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞
NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞
ACHN Adherent人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
MDA-MB-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
COLO 320 HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞
MASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
HIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 600.T細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2BS細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞
BIU87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2591細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞
Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
DU 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞
Super Tube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞、TE5細(xì)胞
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
NIT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞
MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞
DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞
L5178-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞
IPAM-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink細(xì)胞、Hs 822.T細(xì)胞、BEND細(xì)胞
Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML3細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、WM239細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
LLCMK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞
H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞
ACHN Adherent人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞
SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU01細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
D-341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
REC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細(xì)胞、HEMCSS細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞
SHG 44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞
NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞
SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞
CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、H-220細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
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