"MDA-MB-175-VII Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞背景資料：該細胞源自一位５４歲患有乳腺導(dǎo)管癌白人女性的胸腔積液。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-175-VII Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
細胞傳代方法：１：２—１：６傳代，每周換液２—３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
細胞生長特性：松散貼壁生長
MDA-MB-175-VII Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
SW1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
U-2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
NU-GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
SW1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細胞、HuH-1細胞、LNCaP-C4-2細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
MOLM-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞
MDA-MB-175-VII Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
NCI-H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
Mv1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
P30/0HK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞
HS0578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞
GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
HCT-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
Caki-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細胞、B16-F10-BL6細胞、MPVECs細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
P1-Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞
RAW 264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
NCI-H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
GM03569D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
KRCY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
OP-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞
PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞
PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
NCIADR.RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞
MDA-MB-175-VII Adherent人乳腺導(dǎo)管癌細胞系
SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞
686LN-M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
COR-L105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
207細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細胞、B-cell with DC Morphology細胞、AtT-20細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細胞、BC-028細胞、SW756細胞
SW1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69細胞、NCI-H2030細胞、H-711細胞
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