"SK-N-AS Adherent人腦神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SK-N-AS Adherent人腦神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
Panc-1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
細胞傳代方法:1:5-1:10傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
細胞生長特性:貼壁生長
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細胞形態(tài)特性:上皮樣
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時細胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉(zhuǎn)移到預熱的培養(yǎng)基中;2)不適當?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g(shù),并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大小:一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中;2)細胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
NCTC 3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
SJSA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.231細胞、GM04680細胞、UT-7細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
SU.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
SK-N-AS Adherent人腦神經(jīng)母細胞瘤細胞系
HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
LI7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
PC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
MCF7-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
H295R-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
BT474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-727細胞、McA-RH8994細胞、MS-751細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
NK 10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞
SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
BEL 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
IA-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
HT-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
Panc813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
OVCA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
SK-N-AS Adherent人腦神經(jīng)母細胞瘤細胞系
HeLa.S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
C41細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
KMBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
WM451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細胞、U-138 MG細胞、NK10a細胞
RSC-96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-52細胞、CO115細胞、SRA01/04細胞
BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細胞、NCIH226細胞、MV 3細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細胞、LAD 2細胞、Hs695細胞
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