"T1-73 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
T1-73 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
NCI-H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SPCA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
SUM-159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
細胞生長特性：貼壁生長
T1-73 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
PC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
C666-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞
HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
L-5178-Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
MDA-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
T1-73 Adherent人骨肉瘤細胞系
SNU449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細胞、NCI-H1975細胞、HUC-1細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
HEM-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
LS180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
PANC-08-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
NCI-H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSC4.1細胞、PT67細胞、H2108細胞
McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
MDA-MB-231-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞
UPCI:SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
SK-Mel1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
GM2131細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
BIC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
HCC0827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
GM03569D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
KTA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞
T1-73 Adherent人骨肉瘤細胞系
Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞
H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
MyLa 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、Rat Skin 1細胞
NCIH250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH322細胞、NCIH2009細胞、MDA-MB-175VII細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HL-7702細胞、U-87-MG細胞
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