"T1-73 Adherent人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細(xì)胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的,電擊對細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
T1-73 Adherent人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時細(xì)胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細(xì)胞操作】1)吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液;2)吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?!痉盅b稀釋細(xì)胞操作】1)顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長,傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
8305C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞
NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞
HTR8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SPCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
T1-73 Adherent人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞
【細(xì)胞培養(yǎng)中細(xì)菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細(xì)胞仍可生長,但時間長之后,細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅?;蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細(xì)胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預(yù)防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細(xì)胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補(bǔ),建議舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細(xì)胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞
C666-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞
MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞
HSF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞
NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞
OEC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞
HTh 74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞
MDA-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-CTRL細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞
T1-73 Adherent人骨肉瘤細(xì)胞系
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
HCT GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、T_T_細(xì)胞
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
PANC-08-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞
ATC241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細(xì)胞、CA922細(xì)胞、MDBK細(xì)胞
NCI-H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細(xì)胞、PT67細(xì)胞、H2108細(xì)胞
McCoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞、CA-46細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
Swiss3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞
MDA-MB-231-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
UMUC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞
GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
BIC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、SW-756細(xì)胞、ONS76細(xì)胞
SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞
KYSE-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞
alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞
CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
KTA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細(xì)胞、M07e細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞
T1-73 Adherent人骨肉瘤細(xì)胞系
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞
H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL12細(xì)胞、PTK2細(xì)胞、EB2細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
Caov-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR983F細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞
NCIH250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH322細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞
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