"NH-6 Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NH-6 Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
細胞傳代方法：１：２傳代；每周換液２-３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞
SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NH-6 Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
RKO-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
HET1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞
NH-6 Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
HL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞
HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞
SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
H-1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
NRK clone 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
MC3T3E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc10.05細胞、RH7777細胞、UT7細胞
Pa18C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
UPCI:SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
COLO-741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
SR-786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
LAN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞
UMC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
253JBV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
SUM159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
HCC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞
293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
NCIH69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞
TK10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
McG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
RIN Cl-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
NH-6 Adherent人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞系
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
H-1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞
H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
Tca-8113細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
GM04154B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細胞、MDA.MB.435細胞、H1341細胞
CaSki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細胞、WILL-2細胞、H-650細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、MCF-7細胞、MFE 280細胞
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