"HPAF-II Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HPAF-II Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H810細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞
HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
HUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
HPAF-II Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
KU-812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞
L-1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MJ細(xì)胞
hMSC-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞
CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、mREC細(xì)胞
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
mousepodocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HH [Human lymphoma]細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞
PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞
HDMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞
H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞
HTR-8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞
HPAF-II Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
FAK+/+細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞、RD-ES細(xì)胞
52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc04.03細(xì)胞、BT-20細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
MDA-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、OC 316細(xì)胞
HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 116細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞
HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
KYSE-450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHHCALL2細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞
HT144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細(xì)胞、COLO829細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
KYSE180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
HSC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞
JHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細(xì)胞、LP1細(xì)胞、IM95細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞
COLO-679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-6細(xì)胞、H283細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞
KYSE0410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H929細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞
HMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞、KU.812細(xì)胞
KPL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細(xì)胞、WML2細(xì)胞、ABC1細(xì)胞
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
Pt K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞、KM12細(xì)胞
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞
McARH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADR.RES細(xì)胞、MRCV細(xì)胞、MASMC細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
NCIH2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Colon 38細(xì)胞、WB F344細(xì)胞、KE37細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8-653細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞
SK Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞、SW-579細(xì)胞
HPAF-II Adherent人胰腺癌細(xì)胞系
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
BC-020細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-8161細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞、B-16細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、8305C細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞
SF126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH-2細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞、A10細(xì)胞
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