"HEK293-FT Adherent表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞系
細胞背景資料:該細胞穩(wěn)定表達SV40大T抗原,并且促進最適病毒產物的產生。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HEK293-FT Adherent表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
SW 1271細胞系相關產品:J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞
NCI-H1915細胞系相關產品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關產品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CHO-ori細胞系相關產品:FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
H1395細胞系相關產品:MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
SuDHL 10細胞系相關產品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
細胞生長特性:懸浮生長
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細胞形態(tài)特性:圓形
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴重的,會導致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
hCMEC/D3細胞系相關產品:SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
HT 1080.T細胞系相關產品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
C666-1細胞系相關產品:AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
Tca-8113細胞系相關產品:KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
SUP-B15細胞系相關產品:NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
SP-2細胞系相關產品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
UPCI:SCC90細胞系相關產品:Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
58F細胞系相關產品:BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
U2-OS細胞系相關產品:bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
Sci-1細胞系相關產品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
SW837細胞系相關產品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
PC3-M細胞系相關產品:Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關產品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
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J82 COT細胞系相關產品:TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞
HeLa229細胞系相關產品:RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
AR42J細胞系相關產品:COR-L88細胞、TI-73細胞、HeLa S 3細胞
138 MG細胞系相關產品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
H-2347細胞系相關產品:Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
PCI:SG231細胞系相關產品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
RPMI-2650細胞系相關產品:BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
AML-12細胞系相關產品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
MOLM16細胞系相關產品:16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
Pa14C細胞系相關產品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
TE671/RD細胞系相關產品:WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
DoTc2-4510細胞系相關產品:MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
UPCISCC090細胞系相關產品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
SCC154細胞系相關產品:Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
A 72細胞系相關產品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
P3/NS-1細胞系相關產品:3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
Hx147細胞系相關產品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
mRTEC細胞系相關產品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關產品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關產品:SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
IR983F細胞系相關產品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
SNU-878細胞系相關產品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
RSC-96細胞系相關產品:SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
H-146細胞系相關產品:HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
32Dcl3細胞系相關產品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
H446細胞系相關產品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
UCLA NPA871細胞系相關產品:MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
PLA-802細胞系相關產品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
Panc 10.05細胞系相關產品:U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
H2198細胞系相關產品:Malme3M細胞、NK10a細胞、TB-1 Lu細胞
Pan02細胞系相關產品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
F98細胞系相關產品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關產品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
JJN-3細胞系相關產品:HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
NCI-SNU-601細胞系相關產品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
HMC細胞系相關產品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
HEK293-H細胞系相關產品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
HEK293-H細胞系相關產品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
P-388細胞系相關產品:ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
PANC 1005細胞系相關產品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞
NHLF細胞系相關產品:149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
NCI-H1184細胞系相關產品:H748細胞、L363細胞、Hs 870.T細胞
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MDA MB 231細胞系相關產品:L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
HPASMC細胞系相關產品:SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
OCI-AML3細胞系相關產品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
SW 756細胞系相關產品:G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
TCCPAN2細胞系相關產品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
OV-CA 432細胞系相關產品:KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
KNS-62細胞系相關產品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
1.1B4細胞系相關產品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
HeLa S-3細胞系相關產品:HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
SCC 9細胞系相關產品:MLE-12細胞、PA1細胞、HEK-2細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關產品:H1404細胞、MS751細胞、2780細胞
C666-1細胞系相關產品:AM細胞、CX1細胞、NCI H716細胞
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關鍵字: HEK293-FT Adherent表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產、銷售與服務于一體的專業(yè)生物制品和化學品供應商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標準實驗室與生產廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術團隊,提供超過100000的生物、化學產品,產品涵蓋化學、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領域。公司秉承“客戶至上、服務一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質的產品和服務提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內外各種品牌的高品質試劑產品,充分滿足客戶的試劑需求。