"DU145 Cells|人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:DU 145 是從一位有3年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉移灶中建立的。該細胞系未檢測到激素敏感性,酸性酶陽性,單個的細胞可在軟瓊脂中形成集落。對此細胞和原始腫瘤的亞顯微結構分析可見微絨毛、微絲、細胞橋粒、線粒體、發(fā)達的高爾基體和異質溶酶體。該細胞不表達前列腺抗原。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
CHO K1細胞系相關產品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
HCC15細胞系相關產品:FRO81-2細胞、YD-38細胞、MOLT.4細胞
TSU-Pr1細胞系相關產品:H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質,吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
DU145 Cells|人前列腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
A2058細胞系相關產品:SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
hSCC-25細胞系相關產品:SF 295細胞、K1735細胞、HDF-a細胞
Lewis Lung Cancer細胞系相關產品:Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞
SK UT 1細胞系相關產品:SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DU145 Cells|人前列腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
GM03320細胞系相關產品:SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
SKNFI細胞系相關產品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
SCC-15細胞系相關產品:MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞
SW620細胞系相關產品:Granta 519細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、Vero-76細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
HCA 7細胞系相關產品:H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
KYSE-510細胞系相關產品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
Hs940.T細胞系相關產品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
Hi5細胞系相關產品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
Hs 578T細胞系相關產品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
SHEP1細胞系相關產品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
MCF-10A細胞系相關產品:NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
HSF細胞系相關產品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
DU145 Cells|人前列腺癌細胞系
SU-DHL-2細胞系相關產品:KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞
HA細胞系相關產品:HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
UCH1細胞系相關產品:HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
Hs-27細胞系相關產品:SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
TK10細胞系相關產品:KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
OVCAR 4細胞系相關產品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
NCI-H841細胞系相關產品:BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
NCIH2135細胞系相關產品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
NCIH2135細胞系相關產品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
FRO81-2細胞系相關產品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
CMT-167細胞系相關產品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
OCI-Ly3細胞系相關產品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
TGW-nu-1細胞系相關產品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
OCI-LY-3細胞系相關產品:MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
MDAMB330細胞系相關產品:Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
SW 1783細胞系相關產品:BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
DMS114細胞系相關產品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
SHEE細胞系相關產品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
COLO-824細胞系相關產品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
Bac1 2F5細胞系相關產品:X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
HCC1569細胞系相關產品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
RBSMC細胞系相關產品:LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
NK92細胞系相關產品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞
MMQ細胞系相關產品:Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
Hs852T細胞系相關產品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
HCC-1937細胞系相關產品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
PANC0504細胞系相關產品:ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
OCI AML3細胞系相關產品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
SUD6細胞系相關產品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
HB611細胞系相關產品:HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB(HCF)細胞
OVCA432_Bast細胞系相關產品:NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
A9(Hamprecht)細胞系相關產品:SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞
OVCAR3細胞系相關產品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
CHP-100細胞系相關產品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
COLO829細胞系相關產品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
NR8383.1細胞系相關產品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
COLO.205細胞系相關產品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關產品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
RPMI 8402細胞系相關產品:Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
HCC-1806細胞系相關產品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
C2BBe 1細胞系相關產品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞
COLO 320細胞系相關產品:THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
AtT 20細胞系相關產品:HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
H-1581細胞系相關產品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
293T/17細胞系相關產品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞
DHL-5細胞系相關產品:KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產品:BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
GM05372細胞系相關產品:J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
32Dcl3細胞系相關產品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
NCIH1666細胞系相關產品:MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
DU145 Cells|人前列腺癌細胞系
CCD1095Sk細胞系相關產品:NCI-H711細胞、NCI-747細胞、KLM1細胞
NKT細胞系相關產品:MASMC細胞、LC-2 ad細胞、SW 780細胞
Hs934T細胞系相關產品:Kit-225-K6細胞、Pt-K1細胞、HEK;293細胞
Case 3細胞系相關產品:NB9細胞、EOC 20細胞、H-1838細胞
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