"NRK Cells|大鼠腎細胞系
細胞背景資料:腎;自發(fā)永生;Osborne-Mendel
細胞形態(tài):上皮細胞樣
NB1-RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
細胞生長:貼壁
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
NRK Cells|大鼠腎細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
IMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
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細胞生長特性:貼壁
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
AML-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化,對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化,細胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進行,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復(fù)凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
LA-N-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
MC 3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
SuDHL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
NRK Cells|大鼠腎細胞系
RPMI-2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
Vero from pool #76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
RPMI #8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
MBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細胞、MC3T3-E細胞、HCT.116細胞
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
HCC1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
NCIH2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
KPL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
TE354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
32D CL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
OCILY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
SV-HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞
MOVAS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
KAT5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
MMAc-SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
GM04154B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細胞、HCV-29細胞、SNU-354細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
CTX TNA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞
HEK 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR 146細胞、Chang liver細胞、RPMI No. 1846細胞
HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
D407 RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
NRK Cells|大鼠腎細胞系
S16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細胞、HOPC細胞、NCI-H322T細胞
VM Cub 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細胞、DHL6細胞、hFOB細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、CCD-841CoN細胞、RGE細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細胞、MMAc.SF細胞、HCC0095細胞
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