"PC-3 Adherent人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:PC-3源于一位62歲白人男性IV級前列腺腺癌患者的骨轉(zhuǎn)移灶;有低水平的酸性酶活性和5-α-睪酮還原酶活性。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代的操作步驟注意事項:1)操作前要洗手,進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈,操作在火焰附近進行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟:1)吸出細胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PC-3 Adherent人前列腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞,消化溫度是37℃;2)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度;(3)吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液?!敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液;2)吸細胞懸液入離心管:將細胞懸液吸入10ml離心管中;3)平衡離心:平衡后將離心管放入臺式離心機中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘;4)棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】1)顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察細胞量,必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長,傳代細胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。最后要做好標(biāo)記;2)分裝:將細胞懸液吸出分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋;3)繼續(xù)培養(yǎng):用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶,適當(dāng)旋松瓶蓋,放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞2小時后開始貼附在瓶壁上。
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
NCI-H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
細胞生長特性:貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長
PC-3 Adherent人前列腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
養(yǎng)了幾年細胞,說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法:1)培養(yǎng)細胞前,可以看看細胞特點說明書,包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細胞,就得細心呵護了,胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間,每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況;4)凍存細胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細胞的教訓(xùn):不能偷懶!細胞虐我千百遍,我待細胞如初戀。1)不管買的細胞、惠贈的細胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,買個支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個人衛(wèi)生。
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
VERO C 1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細胞、AAV-293細胞、DC 2.4細胞
YH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
MDCK.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
IHH4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
PC-3 Adherent人前列腺癌細胞系
H-1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞
T 84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞
DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
hFOB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
Hs 683.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
SHIN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
ROS-17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
VK2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細胞、H660細胞、C17細胞
RPMI8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細胞、MDCC MSB1細胞、Rat 1細胞
Hs-578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細胞、P3-Jiyoye細胞、UMR-106細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
SCC 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
Hs821T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
RINm5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
Hs940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
EFO-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
16HBE14o-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
MDA-MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
UM-UC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
PC-3 Adherent人前列腺癌細胞系
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
HD-LM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
NCI-H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL28細胞、L1210細胞、SCC-4細胞
PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAEC細胞、NK92-MI細胞、HOP 92細胞
DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細胞、MH7A細胞、DanG細胞
Cates-1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK 21細胞、EFM-192C細胞、NCI-SNU-475細胞
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