"UM-UC-3 Adherent人膀胱移行癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
UM-UC-3 Adherent人膀胱移行癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我常看到一個比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
PL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
Hs 706.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
H4IIE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
細胞生長特性:貼壁生長
UM-UC-3 Adherent人膀胱移行癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗?!静僮鞑襟E】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當消化液濃度過高時,消化時間應縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
C42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
MMAc-SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
HCa/16A3-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
T2(174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細胞、H295R細胞、CNE2Z細胞
UM-UC-3 Adherent人膀胱移行癌細胞系
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
P30-OHKUBO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
Panc 03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
HEC151細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細胞、LN-382細胞、253J細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
HSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
EO771細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
LA-N-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
BN-CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
SK ES 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
LAN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞
L929(NCTC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
SW260細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
DU 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
SCCVII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
BNL.CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細胞、MA-104細胞、NCIH244細胞
OCI-LY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
UM-UC-3 Adherent人膀胱移行癌細胞系
X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
SPC-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細胞、BC-024細胞、751細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞
3T3-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
BJA-B-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細胞、C-Lu65細胞、SKHEP1細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2a細胞、4T1.2細胞、KMS11細胞
NCI-H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細胞、293E細胞、H-23細胞
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