"NB4 Adherent急性早幼粒細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NB4 Adherent急性早幼粒細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】１)預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
B-CPAP細胞系相關產(chǎn)品：MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
HDQ-P1細胞系相關產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SUM-102PT細胞系相關產(chǎn)品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
T2細胞系相關產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
EB2細胞系相關產(chǎn)品：CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NB4 Adherent急性早幼粒細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
H1792細胞系相關產(chǎn)品：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
NGEC細胞系相關產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
KB細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
ACC-3細胞系相關產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
NCCIT細胞系相關產(chǎn)品：L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
CF-1 MEF細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
SKRC-39細胞系相關產(chǎn)品：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
WB F344細胞系相關產(chǎn)品：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
D341 Med細胞系相關產(chǎn)品：A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
HGC-27細胞系相關產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
PL-45細胞系相關產(chǎn)品：KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
NB4 Adherent急性早幼粒細胞系
U-343細胞系相關產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關產(chǎn)品：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
HIBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
OE-19細胞系相關產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
Tn5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
NOZC-1細胞系相關產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
HPMC細胞系相關產(chǎn)品：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
OCI AML2細胞系相關產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
MHH-CALL2細胞系相關產(chǎn)品：D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞
CFPAC1細胞系相關產(chǎn)品：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
Hepa-RG細胞系相關產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
MCF-12A細胞系相關產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
Sc-1細胞系相關產(chǎn)品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
Hs 688(A).T細胞系相關產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
Japanese Tissue Culture-39細胞系相關產(chǎn)品：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
LSC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞
HCC-38細胞系相關產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
U20S細胞系相關產(chǎn)品：GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
P3HR1-BL細胞系相關產(chǎn)品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
RMG1細胞系相關產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
HCC 70細胞系相關產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
A 375細胞系相關產(chǎn)品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
FET細胞系相關產(chǎn)品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
Hs343T細胞系相關產(chǎn)品：Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞
L- cell細胞系相關產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
JEG3細胞系相關產(chǎn)品：L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
NRK49F細胞系相關產(chǎn)品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
OVCA5細胞系相關產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞
SW 1573細胞系相關產(chǎn)品：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
Plaepi 34細胞系相關產(chǎn)品：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
SKHEP1細胞系相關產(chǎn)品：Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
KOSC-2 cl3-43細胞系相關產(chǎn)品：Calu6細胞、MDCC-MSB1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞
KE37細胞系相關產(chǎn)品：H2107細胞、J111細胞、M14細胞
SO-Rb 50細胞系相關產(chǎn)品：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
SK-NEP-1細胞系相關產(chǎn)品：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
RWPE-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
RH8994細胞系相關產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
NB4 Adherent急性早幼粒細胞系
Mel-RM細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
HSC細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
NT-2細胞系相關產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
H4-II-EC3細胞系相關產(chǎn)品：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞
MS1細胞系相關產(chǎn)品：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
ME1細胞系相關產(chǎn)品：TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
Calu-6細胞系相關產(chǎn)品：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細胞、GM03573A細胞、2BS細胞
Beta-TC-6細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、NCI-SNU-423細胞、NCTC clone 929細胞
KBM-7細胞系相關產(chǎn)品：KY-50細胞、NCI-H2126細胞、WM266mel細胞
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