"HCCLM3 Adherent高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCCLM3 Adherent高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
GM-3573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
HCCLM3 Adherent高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞
HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
MCA 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
HCCLM3 Adherent高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞
WEHI-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞
OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞
OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞
McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞
Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
H-3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
HuNS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHFK細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞、ACHN細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 6細(xì)胞、no.11細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞
FHs74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細(xì)胞、751細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞
P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞
Daoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB-17細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
NK-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞
OCILY10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞
Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞
SW-527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞
SUM 149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細(xì)胞、SHEE細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
mousepodocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HH [Human lymphoma]細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
HCCLM3 Adherent高轉(zhuǎn)移人肝癌細(xì)胞系
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞
HCC-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
D341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A172細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、LN-229細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
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