"PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)。 此細(xì)胞系原先被支原體污染,后用BM-cycline去除支原體
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周?chē)?,然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我??吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法,這個(gè)挺有意思,我也是次聽(tīng)說(shuō),應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法,很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近300株細(xì)胞里面,還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco2其實(shí)是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好,這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
FL62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲(chóng)、真菌的污染情況總結(jié)】支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁,原體感染,國(guó)內(nèi)血清很多都沒(méi)有做支原體陰性檢測(cè),而支原體是牛血清中最常見(jiàn)的微生物之一。而且它不能用過(guò)濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂(lè)菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細(xì)胞培養(yǎng),無(wú)任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話(huà), 建議用8ug/ml的濃度;黑蛟蟲(chóng):可以穿透濾膜,也可以通過(guò)空氣傳播,低倍下為黑色點(diǎn)狀,高倍下可看見(jiàn)黑色的小蟲(chóng)游來(lái)游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會(huì)太影響,細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無(wú)明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無(wú)明顯變化,可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類(lèi)似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失,除更換血清外無(wú)須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話(huà),可以增加細(xì)胞的種板密度,以提高細(xì)胞的生存率;真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開(kāi)始很像死細(xì)胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,也很難救活了。
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
HuT 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞
GM00637B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞
HGMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞
Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞、RAW264細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞
NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細(xì)胞系
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
V79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞
V79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
Panc-813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞、OE-19細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞
MDA.MB.231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞
FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞
V79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞
ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞
KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細(xì)胞、COV362細(xì)胞、SNU216細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞
NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞
HUT125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE 12細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
SV40-HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Mar細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
RBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞
SUM52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-12細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞
Vx-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞
NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
HEM-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z310細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞
GM00637I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH292細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、HS-940-T細(xì)胞
ssMCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞
HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
PLC/PRF/5 Adherent人肝癌亞力山大細(xì)胞系
Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES1細(xì)胞、P3.653細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
Raji細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VAESBJ細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞
RFL 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細(xì)胞、GM2131細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細(xì)胞、A-875細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、ESC細(xì)胞
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