"NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細胞系
細胞背景資料:1980年分離建立。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)時分布不均勻,通常操作步驟:做細胞生物學實驗,細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細胞懸液,沿孔壁(稍離開一點孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需完全打到,輕輕按下即可,每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(zhuǎn)(逆時針效果不好),依次敲擊剩余三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,晃動浸潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔依此類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后),先順時針搖晃3次,馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我??吹揭粋€比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
GA-10 (Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM細胞、CEM細胞、KMY1022細胞
COLO-679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-6細胞、H283細胞、3T3-442A細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
細胞接收操作說明:請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式:T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用,懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多,當然,有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞,但是,長期經(jīng)驗來說,貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化,估計是細胞培養(yǎng)空間狹小,血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生),個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用,主要是冬天天氣冷,溫度低于4℃的地方,都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶:是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后,拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋,不拆封口膜,表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用,如細胞密度高于80%,可以直接消化傳代,相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管:是用15ml離心管發(fā)貨的形式,只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上,再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶,可以暫時T75培養(yǎng)瓶,加入10-15ml培養(yǎng)基,建議10ml培養(yǎng)基,也可以使用T175培養(yǎng)瓶,加入50-60ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)瓶越大,需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話,不用大瓶子,先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的,不然會長得很慢,嚴重的,會導致細胞死亡等危險),平衡完成后,離心(1000rpm,3min)收集細胞,棄上清,用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰:是用本公司凍存液凍存細胞后,直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
SK-MEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
SUDHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
MC 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
QSG-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
H-1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
H-2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
OSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細胞系
RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
OCI-Ly 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
RIN-14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
HCa/16A3-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
Caco-2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
MOLT 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H676B細胞、NBLAN5T細胞、TMK-1細胞
NCI-H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
Hs_578t細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞
HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
AU-565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
SK-ES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞
H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞
MDA-MB-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞
H1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞
RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞
PANC0203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
NCI-H226 Adherent人肺鱗癌細胞系
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
Y3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞
SU86_86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
HPMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、L-1210細胞、UK Pan-1細胞
Hs840_T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細胞、PCI-4.2細胞、Y3-Ag123細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone Y1細胞、RPMI1788細胞、QGP1細胞
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