"KM12-SM Cells|人結腸癌肝轉移細胞系
細胞背景資料：結腸癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SW 403細胞系相關產品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
KP-2細胞系相關產品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
EA.Hy926細胞系相關產品：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
細胞生長：貼壁
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
KM12-SM Cells|人結腸癌肝轉移細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
Sup T-1細胞系相關產品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
SK-MEL28細胞系相關產品：Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
A2780 CP70細胞系相關產品：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關產品：EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KM12-SM Cells|人結腸癌肝轉移細胞系
細胞生長特性：貼壁
KE39細胞系相關產品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關產品：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關產品：451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞
細胞培養(yǎng)中常用設施及設備：實驗室設計：細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設計原則一般是無菌操作區(qū)設在室內較少走動的內側，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。常用設施及設備：1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側流式、直流式和外流式三大類。2)無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無菌物品等。3)操作間：普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物。4)洗刷消毒間：烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等。5)分析室：顯微鏡、計算機及打印機等。
IB-RS-2細胞系相關產品：CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關產品：PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
HS578T細胞系相關產品：MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
RPMI2650細胞系相關產品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
HL-60細胞系相關產品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
AHH-1細胞系相關產品：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
SK MEL 28細胞系相關產品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
Mv1Lu細胞系相關產品：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
KM12-SM Cells|人結腸癌肝轉移細胞系
MUTZ-3細胞系相關產品：H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
SW579細胞系相關產品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
U-251_MG細胞系相關產品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞
HECCL-1細胞系相關產品：K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
SP-2細胞系相關產品：FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
OV 2008細胞系相關產品：FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
SNU-C1細胞系相關產品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
HBL-100細胞系相關產品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
HBL-100細胞系相關產品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
H-295R細胞系相關產品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
SNU484細胞系相關產品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產品：NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
ISHI細胞系相關產品：SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞
H-1688細胞系相關產品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
OVCAR432細胞系相關產品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
SW756細胞系相關產品：UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
THLE2細胞系相關產品：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
IGROV-1細胞系相關產品：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
CHO K1細胞系相關產品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
HSAS1細胞系相關產品：hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
H-2087細胞系相關產品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
Caov-4細胞系相關產品：IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
IR 983F細胞系相關產品：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞
NW-38細胞系相關產品：Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞
rRTEC細胞系相關產品：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
HRIF細胞系相關產品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
L929細胞系相關產品：NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
751細胞系相關產品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
HECV細胞系相關產品：CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
Hs870T細胞系相關產品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
HS-445細胞系相關產品：PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
SCC-9細胞系相關產品：Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
MDCKII-WT細胞系相關產品：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關產品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
Daoy細胞系相關產品：KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞
Malme-3M細胞系相關產品：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
Hi-5細胞系相關產品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
Hi-5細胞系相關產品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關產品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
GM07404D細胞系相關產品：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
PF382細胞系相關產品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
266 Bl細胞系相關產品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
IHC-ST1細胞系相關產品：Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關產品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
SUD-4細胞系相關產品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
HTh74細胞系相關產品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
C2BBe1細胞系相關產品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
NCTC929細胞系相關產品：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
PLC細胞系相關產品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
SKGT4細胞系相關產品：BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞
Clone 166細胞系相關產品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
KM12-SM Cells|人結腸癌肝轉移細胞系
Hs27細胞系相關產品：K299細胞、H220細胞、GM07404D細胞
Panc 02.03細胞系相關產品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、KP-N-NS細胞、Chinese Hamster Lung細胞
Hs-578-T細胞系相關產品：H2196細胞、SNU-398細胞、Walker-256細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關產品：Panc327細胞、Adeno 293細胞、LS 123細胞
"