"RPMI-7666 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
HT29細胞系相關產品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
RCC 7860細胞系相關產品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
GM03320細胞系相關產品:SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
細胞生長:懸浮
RPMI-7666 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
KALS-1細胞系相關產品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
SK Hep1細胞系相關產品:D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
ZR75-30細胞系相關產品:NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞
H-676細胞系相關產品:X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關產品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RPMI-7666 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
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SUDHL5細胞系相關產品:T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞
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RPMI-7666 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
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HOS (TE85)細胞系相關產品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
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H196細胞系相關產品:WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞
ACC3細胞系相關產品:SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
JOSK-M細胞系相關產品:SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
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TR146細胞系相關產品:NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關產品:MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
B16F1細胞系相關產品:870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
PCI-4B細胞系相關產品:GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
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HPDLF細胞系相關產品:HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞
TE7細胞系相關產品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
COLO320 DM細胞系相關產品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
SKRC-42細胞系相關產品:H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
NCI-H1963細胞系相關產品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
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UCD-MLA-144細胞系相關產品:SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
H-2405細胞系相關產品:Lu-99A細胞、WiDr細胞、WM115F細胞
M109細胞系相關產品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
SUDHL2細胞系相關產品:L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
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VM-CUB-I細胞系相關產品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞
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B78細胞系相關產品:RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
PANC-03-27細胞系相關產品:hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
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HBL-100細胞系相關產品:NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
MC-3T3細胞系相關產品:CESS細胞、MDAMB436細胞、HEK 293A細胞
C26細胞系相關產品:LS123細胞、HFL-I細胞、SK-MEL-24細胞
BCaP 37細胞系相關產品:LA-N-1細胞、H-28細胞、OK-WT細胞
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關鍵字: RPMI-7666 Lymphoblastoid cells人外周血B淋巴細胞系
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