"SUP-B1 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
MFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
細胞生長：懸浮
SUP-B1 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
PLC-PRF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
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細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
OV3121細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
NCIH196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
SUP-B1 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
B16/F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
H4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞
C33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
CV-1 in Origin Simian-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1993細胞、PG-4 (S+L-)細胞、TF-1a細胞
RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
RetroPack PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
H-920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞
SaOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
MCF7-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
KMS-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
OVCAR420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
HCE-2 [50.B1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞
BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
KTCTL-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
NK-92 MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
EB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞
TSUpr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞
EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
RKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
R2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞
SUP-B1 Lymphoblastoid cells人Ph+急淋白血病細胞系
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、PL-12細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細胞、B35細胞、SCL II細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Panc02細胞、HT-55細胞
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