"Dakiki Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
細胞背景資料：B淋巴細胞；EBV轉染
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
253J-Bladder-V細胞系相關產(chǎn)品：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
PLA-801D細胞系相關產(chǎn)品：THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
細胞生長：懸浮
Dakiki Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
A375細胞系相關產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞
H2330細胞系相關產(chǎn)品：MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞
KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
HUC細胞系相關產(chǎn)品：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
CG-4細胞系相關產(chǎn)品：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Dakiki Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
A20細胞系相關產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
H2023細胞系相關產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
HELA-GFP細胞系相關產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
no-11細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
MDA-MB361細胞系相關產(chǎn)品：DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞
CF-PAC1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2452細胞、P30/Ohkubo細胞、NCC-IT細胞
Z-138細胞系相關產(chǎn)品：H838細胞、LNCaP-FGC細胞、D283 Med細胞
RPTEC TERT1細胞系相關產(chǎn)品：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
HCC0070細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
M210B4細胞系相關產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
Dakiki Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
NCI H23細胞系相關產(chǎn)品：H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
RMS13細胞系相關產(chǎn)品：WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
COLO320DM細胞系相關產(chǎn)品：GC-1spg細胞、HFF細胞、HEL 92.1.7細胞
P 815細胞系相關產(chǎn)品：SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
SW1990細胞系相關產(chǎn)品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
RPMI-7951細胞系相關產(chǎn)品：HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
RPMI-7951細胞系相關產(chǎn)品：HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
CHG5細胞系相關產(chǎn)品：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
SNU475細胞系相關產(chǎn)品：NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
CTV1細胞系相關產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
H2286細胞系相關產(chǎn)品：KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
OVCAR 5細胞系相關產(chǎn)品：Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞
Panc-327細胞系相關產(chǎn)品：HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞
KYSE 450細胞系相關產(chǎn)品：Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞
VSMC細胞系相關產(chǎn)品：Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞
TE85細胞系相關產(chǎn)品：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
HEL 299細胞系相關產(chǎn)品：H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
CMT 64細胞系相關產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
EU-3細胞系相關產(chǎn)品：PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
KYSE0520細胞系相關產(chǎn)品：Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
H2342細胞系相關產(chǎn)品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
Y79細胞系相關產(chǎn)品：CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
SNU-398細胞系相關產(chǎn)品：NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞
HCT 8細胞系相關產(chǎn)品：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
MARC-145細胞系相關產(chǎn)品：MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
HCC0095細胞系相關產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
Hs683細胞系相關產(chǎn)品：293-F細胞、LK 2細胞、Line 697細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
P3X63 Ag8細胞系相關產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
EA.Hy926細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
SMA 560細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
NCI-H441-4細胞系相關產(chǎn)品：H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
E6-1細胞系相關產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
NCM-460細胞系相關產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
NCI-SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
MDA468細胞系相關產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
H2286細胞系相關產(chǎn)品：KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
HPC-Y5細胞系相關產(chǎn)品：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
Panc203細胞系相關產(chǎn)品：SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
Sol8細胞系相關產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
CAL-51細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
C3H-10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關產(chǎn)品：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
H-3255細胞系相關產(chǎn)品：HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關產(chǎn)品：SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
Me-Wo細胞系相關產(chǎn)品：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
UMR 106細胞系相關產(chǎn)品：SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
LA-795細胞系相關產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
Dakiki Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系
NRK 52E細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
My-La 2059細胞系相關產(chǎn)品：U-266 AR1細胞、HCEC-12細胞、CCD-966SK細胞
DiFi細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MUVEC細胞、B16-F10細胞
Helacyton gartleri細胞系相關產(chǎn)品：HCGC細胞、NCI.H226細胞、UACC-812細胞
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