"CII Lymphoblastoid cells人慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:慢性淋巴細(xì)胞白血??;女性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
細(xì)胞生長:懸浮
CII Lymphoblastoid cells人慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞
KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細(xì)胞、190PT細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞
OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞
RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CII Lymphoblastoid cells人慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
造成實驗室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
MGH-U3 (RN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、BV-173細(xì)胞
Balb/c3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、BL6細(xì)胞
GM07404A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
NCI-H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
CII Lymphoblastoid cells人慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-31細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞
b.End3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 6細(xì)胞、C1498細(xì)胞、8305-C細(xì)胞
alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988s細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
NCI-H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞
Dunn LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:343MG細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
SW1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞
NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞
PCI-SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞
JM-Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞、GL-261細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
MC3T3E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc10.05細(xì)胞、RH7777細(xì)胞、UT7細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
LC-1-sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞
NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞
MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
NTHY-ORI3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCC-IT細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞
HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
HSC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
TE354T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞
SW626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:XWLC-05細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞、HCV29細(xì)胞
U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
A375-S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、C8166細(xì)胞
HS852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
CII Lymphoblastoid cells人慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
IAR-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞
TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
Balb/c3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞
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