"D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細胞系
細胞背景資料：T淋巴細胞；AKR/J
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
SUP-B15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
細胞生長：懸浮
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
COR-L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞
CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
LIPF178C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
H-1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞
EFM192細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
RBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞
CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細胞系
NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞
U-937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細胞、JM細胞、Epstein-Barr-2細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細胞、NS1-Ag4細胞、ARO81-1細胞
PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
Hs294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
PC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
COLO 320F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
KBM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM-1細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、NW38細胞
HOS(TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAVSMC細胞、NCI-841細胞、NCIH2347細胞
OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
MRC-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
NCI-H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
Anip[973]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
MC-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
TE 85.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞
HUTU80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
LS-411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細胞系
COLO 320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、beta-TC6細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細胞、NCC-IT細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、SW-839細胞
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