"D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：T淋巴細(xì)胞；AKR/J
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞
SUP-B15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞
COR-L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC-7細(xì)胞、JCA1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1E8-H細(xì)胞、H548細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞
HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細(xì)胞、GDM1細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
UO.31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細(xì)胞、GB-1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞
H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
RBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細(xì)胞、P560細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞系
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞
H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞
J774 A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細(xì)胞、C-26細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞
U-937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細(xì)胞、JM細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞
DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞
A 172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A427細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞
Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞
PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞
COLO 320F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-402細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞
FRTL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPASMC細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞
HOS(TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAVSMC細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞
OUMS27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞
AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞
CCRF-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞
NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
MC-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1428細(xì)胞、C3A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞
PFSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT38細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞
TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞
SUDHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞、SKml2細(xì)胞
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞
H-2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞
MC-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-21細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞
EC9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
PNT-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
McA-RH 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H157細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞
JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞
HuT-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞
D10G41 Lymphoblastoid cells小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞系
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
NCIH1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞
T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
UO.31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、SW-839細(xì)胞
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