"697 Lymphoblastoid cells人前B細胞白血病細胞系
細胞背景資料：B淋巴細胞白血??；男性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
CHO-K1細胞系相關產品：V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關產品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
BC-3-H-I細胞系相關產品：CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞
細胞生長：懸浮
697 Lymphoblastoid cells人前B細胞白血病細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結構，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Monomac-1細胞系相關產品：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
NPA87細胞系相關產品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
He-La細胞系相關產品：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
L-1210細胞系相關產品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
OCI-AML-5細胞系相關產品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
697 Lymphoblastoid cells人前B細胞白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SK MEL 28細胞系相關產品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
C8166細胞系相關產品：T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
RD-ES細胞系相關產品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
COLO_320DM細胞系相關產品：HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
MOLT-4細胞系相關產品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
Douglas Foster-1細胞系相關產品：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
CTV1細胞系相關產品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
Molm 14細胞系相關產品：M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
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HSC-6細胞系相關產品：PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
WiDrTC細胞系相關產品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
K562細胞系相關產品：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
NW38細胞系相關產品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
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WM-266-mel細胞系相關產品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
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CORL88細胞系相關產品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
RFL6細胞系相關產品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關產品：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
OCI-LY-7細胞系相關產品：HEC-251細胞、SK-ES-1細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞
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PC3-M細胞系相關產品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
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CEM clone 7細胞系相關產品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
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MCF 7B細胞系相關產品：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
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CHP 100細胞系相關產品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
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BNL-HCC細胞系相關產品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
A20細胞系相關產品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
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HeLaS3細胞系相關產品：KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關產品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
CL 1-0細胞系相關產品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
G292細胞系相關產品：Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
CT-26 WT細胞系相關產品：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞
HR-1細胞系相關產品：HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞
BEL 7402細胞系相關產品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
OCI Ly19細胞系相關產品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
HConEpic細胞系相關產品：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
SNU620細胞系相關產品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
MC-26細胞系相關產品：HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
H226細胞系相關產品：H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
H1299細胞系相關產品：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
SUM149細胞系相關產品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
A172細胞系相關產品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
HCC0366細胞系相關產品：MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
LYR細胞系相關產品：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
LM3細胞系相關產品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
697 Lymphoblastoid cells人前B細胞白血病細胞系
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SW-579細胞系相關產品：OCI/AML3細胞、P30/0HK細胞、CAL 78細胞
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RD-ES細胞系相關產品：BSC1細胞、SUDHL2細胞、Lec1細胞
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