"Nb2 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：惡性淋巴瘤；雄性；Nb

細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣

細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。

HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞

SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞

COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮

Nb2 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞

SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞

GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞

LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞

KTA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞、HOS細(xì)胞

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

Nb2 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。

Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞

PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞

LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞

NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞

Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞

AD-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞

NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞

HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細(xì)胞、GDM1細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞

LICR-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞

HGMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞

Nb2 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系

NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞

SV40 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞

143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞

SW-839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY19細(xì)胞、H-87細(xì)胞、Hi5細(xì)胞

WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞

NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞

NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞

Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞

B95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32.T細(xì)胞、CoC1細(xì)胞、118MG細(xì)胞

Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞

MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞

MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞

RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞

H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞

Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞

LLC-PK(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞

SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞

MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞

Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞

HT 1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞

UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞

Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞

RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞

H-2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞

VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞

OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞

RCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞

Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞

Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞

U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞

J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞

ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞

P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞

KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞

NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞

Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞

RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞

Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞

MCF12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST50細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞、GC-2細(xì)胞

EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞

huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞

PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞

Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞

aTC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞

H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞

C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞

CCRF-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞

HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞

MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞

NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞

Nb2 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系

Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-5細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞、CHG5細(xì)胞

Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞

NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、H-211細(xì)胞

LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、SW-982細(xì)胞

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