"Jiyoye Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 UMRC2細胞系相關產(chǎn)品:32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞 NCI H2106細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞 293 H細胞系相關產(chǎn)品:RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞 細胞生長:懸浮 Jiyoye Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:每周2-3次。 SK ES 01細胞系相關產(chǎn)品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞 RMS 1598細胞系相關產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞 H838細胞系相關產(chǎn)品:E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞 RSMC細胞系相關產(chǎn)品:SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞 JAR細胞系相關產(chǎn)品:SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Jiyoye Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 HEL299細胞系相關產(chǎn)品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞 Tu177細胞系相關產(chǎn)品:CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞 Colon 38細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞 hRPTC細胞系相關產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞 RF/6A細胞系相關產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞 HCC95細胞系相關產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞 HONE-1細胞系相關產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞 HUT 28細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞 NCIH1184細胞系相關產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞 6-10B細胞系相關產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞 Jiyoye Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系 NCIH1876細胞系相關產(chǎn)品:OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞 PBL細胞系相關產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞 NCI H295R細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞 PK13細胞系相關產(chǎn)品:MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞 TPC-1細胞系相關產(chǎn)品:OUMS23細胞、D407 RPE細胞、RTE細胞 P3J細胞系相關產(chǎn)品:SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞 P3J細胞系相關產(chǎn)品:SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞 LS 513細胞系相關產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞 TE-9細胞系相關產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞 H-1299細胞系相關產(chǎn)品:T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞 K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞 WiDrTC細胞系相關產(chǎn)品:SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞 Ramos 2G6 4C10細胞系相關產(chǎn)品:PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞 WERI-Rb-1細胞系相關產(chǎn)品:HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞 WRL-68細胞系相關產(chǎn)品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞 MV-4:11細胞系相關產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞 HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品:N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞 HS578細胞系相關產(chǎn)品:CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞 HCV-29細胞系相關產(chǎn)品:E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞 Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞 RCC-10RGB細胞系相關產(chǎn)品:Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞 NBLAN5T細胞系相關產(chǎn)品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞 NTERA-2細胞系相關產(chǎn)品:TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞 OACP4 C細胞系相關產(chǎn)品:H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞 293S細胞系相關產(chǎn)品:CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞 C-Li-7細胞系相關產(chǎn)品:SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞 NRK52E細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞 H-1385細胞系相關產(chǎn)品:WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞 KYSE-140細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-453細胞、PCI-SG231細胞、BV-2細胞 GM346細胞系相關產(chǎn)品:LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞 HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞 OLN-93細胞系相關產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞 C-4I細胞系相關產(chǎn)品:BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞 DF-1細胞系相關產(chǎn)品:H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞 HB 611細胞系相關產(chǎn)品:RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞 H-196細胞系相關產(chǎn)品:HCC941122細胞、NCIH510細胞、X63Ag8-653細胞 SUM 149細胞系相關產(chǎn)品:Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞 KMB17細胞系相關產(chǎn)品:Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞 Hs 746.T細胞系相關產(chǎn)品:SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞 IR983F細胞系相關產(chǎn)品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞 H-2444細胞系相關產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞 H2291細胞系相關產(chǎn)品:RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞 ATDC5細胞系相關產(chǎn)品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞 OCI/AML-4細胞系相關產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞 NCI-SNU-16細胞系相關產(chǎn)品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞 EOL1細胞系相關產(chǎn)品:H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞 OVCAR.8細胞系相關產(chǎn)品:H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞 PanC1細胞系相關產(chǎn)品:TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞 RAMOS2G64C10細胞系相關產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞 NCIH2227細胞系相關產(chǎn)品:OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞 SNU484細胞系相關產(chǎn)品:Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞 Jiyoye Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞系 H295細胞系相關產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞 JAR細胞系相關產(chǎn)品:SkChA-1細胞、LC-2-Ad細胞、BHK細胞 D-283 Med細胞系相關產(chǎn)品:KALS1細胞、H64細胞、P3-X63Ag8細胞 Colon 38細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SGC996細胞 "
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