"CCRF-CEM Lymphoblastoid cells人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞系 細胞背景資料:G.E. Foley 等人建立了類淋巴母細胞細胞株CCRF-CEM。 細胞是1964年11月從一位四歲白人女性急性淋巴細胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。此細胞系從香港收集而來。 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。 HCC78細胞系相關產品:SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞 Plaepi 34細胞系相關產品:MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞 SNU-739細胞系相關產品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞 細胞生長:懸浮 CCRF-CEM Lymphoblastoid cells人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2傳代。3天內可長滿。 SHEP1細胞系相關產品:SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞 Ly8細胞系相關產品:Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞 Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞系相關產品:H128細胞、HASMC細胞、NCI-H1299細胞 AU 565細胞系相關產品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞 Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關產品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 CCRF-CEM Lymphoblastoid cells人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 H-345細胞系相關產品:V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞 OCI-Ly1細胞系相關產品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞 GM3569細胞系相關產品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞 CAOV4細胞系相關產品:G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞 LLCMK2細胞系相關產品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞 U20S細胞系相關產品:GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞 H889細胞系相關產品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞 UMUC14細胞系相關產品:Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞 IEC-6細胞系相關產品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞 SKMES細胞系相關產品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞 CCRF-CEM Lymphoblastoid cells人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞系 4175細胞系相關產品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞 KALS-1細胞系相關產品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞 KM.12細胞系相關產品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞 H-1666細胞系相關產品:OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞 CEM clone 7細胞系相關產品:NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞 AKR細胞系相關產品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞 AKR細胞系相關產品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞 SW 756細胞系相關產品:G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞 IGR-OV1細胞系相關產品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞 SK ES 01細胞系相關產品:MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞 Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關產品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞 SK-ES細胞系相關產品:LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞 BetaTC6細胞系相關產品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞 NCIH1436細胞系相關產品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞 SKCO1細胞系相關產品:PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞 TE10細胞系相關產品:V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞 hA549細胞系相關產品:MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞 NCI-N87細胞系相關產品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞 Leukemia 1210細胞系相關產品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞 JB6 Cl 30細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞 Hs739T細胞系相關產品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞 HCC941122細胞系相關產品:NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞 Los Angeles Prostate Cancer-4細胞系相關產品:SF295細胞、HKBML細胞、HRVEC細胞 LM TK negative細胞系相關產品:SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞 COLO320-DM細胞系相關產品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞 rRTEC細胞系相關產品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞 OCI AML2細胞系相關產品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞 hEM15A細胞系相關產品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞 BHT-101細胞系相關產品:MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞 Jurkat-E6細胞系相關產品:Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞 NCI-SNU-387細胞系相關產品:Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞 NCI H295R細胞系相關產品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞 K 562細胞系相關產品:Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞 N1S1細胞系相關產品:NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞 201T細胞系相關產品:Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、KALS-1細胞、MDBK (NBL-1)細胞 RPE1-hTERT細胞系相關產品:H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞 HPB/ALL細胞系相關產品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞 TE-3A細胞系相關產品:COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞 U87細胞系相關產品:PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞 Rh30細胞系相關產品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞 Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關產品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞 U87-MG細胞系相關產品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞 B958細胞系相關產品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞 IPLB-Sf21-AE細胞系相關產品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞 IR983F細胞系相關產品:NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞 HS-294-T細胞系相關產品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞 BEL-7404細胞系相關產品:CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞 LICR-HN6細胞系相關產品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞 KPL-1細胞系相關產品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞 BT-325細胞系相關產品:SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞 Colon-26細胞系相關產品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞 CCRF-CEM Lymphoblastoid cells人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞系 U266-B1細胞系相關產品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞 COV434細胞系相關產品:SRS-82細胞、HT 1197.T細胞、SUM190細胞 BSC40細胞系相關產品:J 82細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、RAOEC細胞 GM-346細胞系相關產品:OVHM細胞、DSL-6A/C1細胞、hTERT RPE-1細胞 "
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