"REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! 16HBEo-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞 CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞 Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞 細胞生長:懸浮 REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥N艺務(wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:3—1:6傳代,2-3天換液1次 NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞 H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞 BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞 MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞 BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 P3/X63/Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞 WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞 PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞 IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞 MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞 TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞 AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞 SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞 SK-N-BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞 REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤細胞系 SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞 ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞 A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞 RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞 Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞 WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞 WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞 PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞 X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞 HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞 U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞 COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞 CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞 Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞 TOV21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞 H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞 Capan1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞 HMCB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞 H4-IIE-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞、Walker-Ca.256細胞 mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞 INS-1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞 G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞 JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞 BAC1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細胞、HBVP細胞、VB細胞 F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞 GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞 B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞 MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞 HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞 H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞 OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞 RPMI-7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞 FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞 OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞 C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞 HCFB(HCF)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞 NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞 PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞 143TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞 H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞 MV411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞 SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞 WM 2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞 brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞 SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞 SNU251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞 EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞 HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞 NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞 REC-1 Lymphoblastoid cells人淋巴瘤細胞系 MILE SVEN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞 NCI-H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOPC細胞、Sup T-1細胞、A2008細胞 CNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE33細胞、MIMVEC細胞、SHEE細胞 PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCC1599細胞 "
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