"ST486 Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞 BC3 H1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞 WEHI3B細胞系相關產(chǎn)品:OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞 細胞生長:懸浮 ST486 Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:每2-3天換液 NCI.H522細胞系相關產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞 LN299細胞系相關產(chǎn)品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞 RKO細胞系相關產(chǎn)品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞 NCIH2172細胞系相關產(chǎn)品:MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞 WM 239細胞系相關產(chǎn)品:PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 ST486 Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞瘤細胞系 細胞生長特性:懸浮生長 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 H1975細胞系相關產(chǎn)品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞 HA1800細胞系相關產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞 P-36細胞系相關產(chǎn)品:HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞 MCF.7細胞系相關產(chǎn)品:SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞 MC57G細胞系相關產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞 JM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞 Hs 821.T細胞系相關產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞 OCI-Ly1細胞系相關產(chǎn)品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞 Hs742T細胞系相關產(chǎn)品:Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞 LIXC002細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞 ST486 Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞瘤細胞系 SCLC-21H細胞系相關產(chǎn)品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞 P3-X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞 CAL39細胞系相關產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞 TK-10細胞系相關產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞 NCI-H596細胞系相關產(chǎn)品:MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞 PC-9/GR細胞系相關產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 PC-9/GR細胞系相關產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 JURKAT E-61細胞系相關產(chǎn)品:MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞 OVCA-432細胞系相關產(chǎn)品:MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞 MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 Mel-624細胞系相關產(chǎn)品:CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞 MSTO-211細胞系相關產(chǎn)品:HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞 TI-73細胞系相關產(chǎn)品:Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞 HIMEC細胞系相關產(chǎn)品:NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞 CAL-51細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞 H295R-S1細胞系相關產(chǎn)品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞 Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關產(chǎn)品:G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞 F442-A細胞系相關產(chǎn)品:MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞 M-14細胞系相關產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞 DMS114細胞系相關產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞 CV-1細胞系相關產(chǎn)品:CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞 KYSE510細胞系相關產(chǎn)品:Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞 PC 61細胞系相關產(chǎn)品:CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞 Sp2/0細胞系相關產(chǎn)品:H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞 2PK-3細胞系相關產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞 P3-X63-Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞 KHYG-1細胞系相關產(chǎn)品:Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞 SNU886細胞系相關產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞 H-2085細胞系相關產(chǎn)品:BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞 RPMI2650細胞系相關產(chǎn)品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞 HCCC-9810細胞系相關產(chǎn)品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞 SNU-1040細胞系相關產(chǎn)品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞 RTE細胞系相關產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞 Adeno 293細胞系相關產(chǎn)品:COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞 A2780CP70細胞系相關產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞 751-NA細胞系相關產(chǎn)品:EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞 HCE-2 [50.B1]細胞系相關產(chǎn)品:G-401細胞、HRA-19細胞、NCIH378細胞 SN-12C細胞系相關產(chǎn)品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞 CTLL2細胞系相關產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞 451-LU細胞系相關產(chǎn)品:U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞 UPCI-SCC-90細胞系相關產(chǎn)品:OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞 B16F0細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞 MNNG細胞系相關產(chǎn)品:I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞 KMH2細胞系相關產(chǎn)品:SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞 SUM102細胞系相關產(chǎn)品:CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞 SNU-484細胞系相關產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞 OVCA-432細胞系相關產(chǎn)品:MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞 BTI-Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞 MES23.5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞 Hep2細胞系相關產(chǎn)品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞 SUSM-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞 ST486 Lymphoblastoid cells人B淋巴細胞瘤細胞系 BIU-87/Adr細胞系相關產(chǎn)品:OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞 GM637A細胞系相關產(chǎn)品:HO-8910 PM細胞、Panc02-H0細胞、H-660細胞 HT 1376細胞系相關產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、HM細胞、HCC-15細胞 P-36細胞系相關產(chǎn)品:HCT_116細胞、OVCA-432細胞、HCe-8693細胞 "
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