"NCTC clone 929 fibroblast cells小鼠成纖維細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
MES 13細胞系相關產品：MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞
Mono Mac 6細胞系相關產品：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
SUM-52PE細胞系相關產品：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
細胞生長：貼壁
NCTC clone 929 fibroblast cells小鼠成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結構，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
L(TK-)細胞系相關產品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
GM02219細胞系相關產品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
DMS 79細胞系相關產品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
C17細胞系相關產品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
SKM-1細胞系相關產品：HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
NCTC clone 929 fibroblast cells小鼠成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關產品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關產品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
COS1細胞系相關產品：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞
Hs445細胞系相關產品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
COS-1細胞系相關產品：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
DV90細胞系相關產品：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
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PCI-4B細胞系相關產品：GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
NCI-H508細胞系相關產品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
NMCG1細胞系相關產品：HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞
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MOVAS細胞系相關產品：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
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MDA MB 453細胞系相關產品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
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CCLP1細胞系相關產品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
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MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關產品：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
Hs819T細胞系相關產品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
SLMT1細胞系相關產品：L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
OCI/AML-5細胞系相關產品：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
SKNO-1細胞系相關產品：HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
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Caco-2 BBe細胞系相關產品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
SUM52PE細胞系相關產品：AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
OCM1A細胞系相關產品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
Calu 3細胞系相關產品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
HRA-19細胞系相關產品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
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SMA560細胞系相關產品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
CRFK細胞系相關產品：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
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PANC0327細胞系相關產品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
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WM-266-mel細胞系相關產品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
PLA801-95C細胞系相關產品：NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞
CAL 27細胞系相關產品：NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
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H187細胞系相關產品：NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞
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18G3.cl 1細胞系相關產品：SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
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H1563細胞系相關產品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
NCIH747細胞系相關產品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
A375S2細胞系相關產品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
TMD-8細胞系相關產品：293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞
87 MG細胞系相關產品：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
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SW 480細胞系相關產品：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
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P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
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NCTC clone 929 fibroblast cells小鼠成纖維細胞系
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COS1細胞系相關產品：Pa14C細胞、HS-766T細胞、BMDC細胞
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