"T/G HA-VSMC fibroblast cells人血管平滑肌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
KU19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞
細胞生長：貼壁
T/G HA-VSMC fibroblast cells人血管平滑肌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
ATN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
HNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
T/G HA-VSMC fibroblast cells人血管平滑肌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
SN12C-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞
HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞
MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
T/G HA-VSMC fibroblast cells人血管平滑肌細胞系
OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
32D/cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
NCIH69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞
As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
CEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
CL1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
AU-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
YD-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
LIXC002細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
SCL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
IMR-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞
HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
alpha TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞
RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
T/G HA-VSMC fibroblast cells人血管平滑肌細胞系
NCIH146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO細胞、NCI-SNU-387細胞、HIMEC細胞
SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細胞、H2110細胞、SKGT2細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細胞、OC-316細胞、MC/9細胞
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