"SL-29 fibroblast cells雞胚成纖維細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：胚成纖維細(xì)胞； White Leghorn SPAFAS

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！

MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞

H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細(xì)胞、H841細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞

OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

SL-29 fibroblast cells雞胚成纖維細(xì)胞系

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞

GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞

WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞

PAa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞、C-8161細(xì)胞

P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

SL-29 fibroblast cells雞胚成纖維細(xì)胞系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。

NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞

HuT78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞

GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞

DC2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞

Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞

HCC0038細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞、J-774細(xì)胞

HCPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞

HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞

C 643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細(xì)胞、HTh74細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞

SU-DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-522細(xì)胞、SW 579細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞

SL-29 fibroblast cells雞胚成纖維細(xì)胞系

Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞

AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞

RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞

HLEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞、KE-39細(xì)胞

GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞

FRH-0201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、H-125細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞

U343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-Jurkat細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞

MDCKII-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-SF細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞、JVM2細(xì)胞

ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞

LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞

BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞

SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞

BV-173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞

H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞

HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞

HT 1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL 6細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞、IALM細(xì)胞

HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞

3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞

NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞

BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞

MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞

LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞

MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞

PANC403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM223細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、H-929細(xì)胞

CEM-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞

MDA361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞、QG56細(xì)胞

RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞

EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞

Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞

SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞

NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞

NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞

NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞

CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞

SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞

SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞

Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞

KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞

DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

C32-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLAG-66細(xì)胞、huH 1細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞

Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞

BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞

HCEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe1細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞

CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞

HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞

VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞

WBF344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞

PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞

HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞

PANC 813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT GEO細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、PM6細(xì)胞

SL-29 fibroblast cells雞胚成纖維細(xì)胞系

NCI-H2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細(xì)胞、H-7721細(xì)胞、HT55細(xì)胞

NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞

RCC-JF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、H1618細(xì)胞、TOV112細(xì)胞

GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞、KLE細(xì)胞

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