"HMO6 epithelioid cells人小膠質(zhì)細胞系 細胞背景資料:小膠質(zhì)細胞 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞 L5178-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞 D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞 細胞生長:貼壁 HMO6 epithelioid cells人小膠質(zhì)細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 TGW-nu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞 OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞 SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞 CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞 NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HMO6 epithelioid cells人小膠質(zhì)細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞 293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞 HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞 MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞 SW 1463細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞 OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞 N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞 GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞 Pa14C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞 NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞 HMO6 epithelioid cells人小膠質(zhì)細胞系 H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞 COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞 SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞 SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞 Hs706T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞 Hs706T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞 H-220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞 D 407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞 HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞 BrCL15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞 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